Стволовые клетки при лечении инсульте
Инсульт – тяжелейшее заболевание сосудистой системы мозга, которое приводит к повреждению ткани головного мозга и расстройством его функций. Во многих развитых странах, в том числе и в России, инсульт головного мозга является третьей по значимости причиной смертности после сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, а также одной из основных причин длительной нетрудоспособности.
Инсульт – это патология, которая поражает взрослое трудоспособное население, приводя к длительной госпитализации, стойкой инвалидизации больных, ухудшению качества жизни пациентов и их семей. Это заболевание ложится тяжелым экономическим бременем как на пациента, так и на систему здравоохранения. В США общие прямые затраты на лечение инсульта, уход за больными и их реабилитацию оцениваются в 30 миллиардов долларов в год. В 2004 году в Челябинской области инсульт перенесли 93 тысячи человека, потеряв при этом работоспособность и получив инвалидность.
Различают геморрагический и ишемический инсульт.
- Геморрагический инсульт обусловлен кровоизлиянием в мозг.
- Ишемический инсульт (инфаркт мозга) развивается при закупорке сосудов атеросклеротической бляшкой или другими факторами, приводя к сужению сосудов мозга или их спазму. При этом нарушается или прекращается снабжение клеток кислородом и питательными веществами, что и приводит их к гибели. Именно поэтому главная задача при лечении инсульта – восстановление тока крови к месту поражения клеток.
В настоящее время новые перспективы в лечении инсульта открыты благодаря клеточным технологиям. Новые клеточные технологии коренным образом изменили традиционные подходы в лечении неврологических заболеваний и, в особенности, последствий инсультов. Открытие стволовых клеток и механизма их действия опровергнуло старый постулат медицины о том, что нервные клетки не восстанавливаются. Оказалось, что стволовые клетки способны проникать в поврежденные зоны головного мозга, минуя гематоэнцефалический барьер, замещая собой поврежденные нервные клетки, восстанавливая нормальное кровоснабжение.
Исследователи полагают, что многие нервные клетки в умеренно пострадавших от инсульта областях мозга живут еще достаточно долгое время и постепенно погибают в результате апоптоза, или запрограммированной гибели клеток. Введение стволовых клеток позволяет значительно ослабить апоптоз и спасти эти клетки.
Стволовые клетки и инсульт
Результаты последних исследований говорят о том, что ткани мозга человека и млекопитающих обладают способностью частично восстанавливаться после массовой гибели нервных клеток, вызванной нарушениями кровообращения при инсульте. По этим данным, незрелые нервные клетки – нейробласты, мигрируют в пораженную область из особой субвентрикулярной зоны, расположенной под боковыми желудочками головного мозга. Попав в зону поражения, нейробласты дифференцируются в зрелые нейроны, которые начинают выполнять функции погибших после инсульта клеток. Группой американских ученых было установлено, что стволовые клетки участвуют в восстановлении тканей головного мозга после инсульта. Было обнаружено, что миграцией незрелых нервных клеток, замещающих погибшие нейроны в поврежденных областях, управляют белки, вырабатываемые внутренней оболочкой вновь формирующихся кровеносных сосудов. Они предположили также, что веществами, которые непосредственно стимулируют начало миграции нейробластов, являются два белка, вырабатываемые эндотелием (внутренним клеточным слоем) вновь формирующихся сосудов: фактор клеток стромы -1 (SDF-1) и ангиопэтин-1 (Ang-1).
В ряде исследований были получены данные о том, что стволовые клетки могут быть использованы для восстановления функций головного мозга после перенесенного инсульта. К такому выводу пришли исследователи из Стэнфордского университета, вводившие эмбриональные стволовые клетки в пораженный инсультом мозг крыс. Ученые заметили, что стволовые клетки мигрируют в поврежденную область и в дальнейшем развиваются как нормальные клетки мозга. Если выяснится, что такие клетки не только физически замещают дефект, но и берут на себя функцию поврежденных клеток, это может стать прорывом в лечении последствий инсультов у человека. Руководитель исследований, доктор Гэри Стейнберг, считает, что при введении стволовых клеток недосредственно в область инсульта они гибнут, так как кровоснабжение пораженной области нарушено. А вот если клетки вводить в соседние области, то они не только приживаются, но и мигрируют к зоне инсульта. Ученые считают, что из поврежденной области идет своеобразный “сигнал бедствия”, который “призывает” стволовые клетки. В подтверждение этой догадки медики привели тот факт, что у здоровых крыс стволовые клетки мигрировали на расстояние в 0,2 миллиметра, а у перенесших инсульт – на 1,2 миллиметра. Важно при этом отметить, что в качестве донорских клеток можно использовать и стволовые клетки из других источников.
Так, исследователи из медицинского колледжа Джорджии и Университета Южной Флориды (США) показали, что внутривенное введение стволовых клеток из пуповинной крови (ПК) при одновременном введении с фармакологическим препаратом (маннитолом) существенно уменьшает размеры разрушений, к которым приводит инсульт. В данном исследовании ученые впервые применили лекарство “маннитол” для обеспечения вводимым стволовым клеткам временного прохода сквозь барьер, защищающий мозг от попадания крови, после чего сразу же ввели стволовые клетки ПК человека животным, у которых предварительно был спровоцирован инсульт. Если трансплантация была осуществлена в течение первых нескольких часов или даже дней после инсульта, это приводило к уменьшению инсульта на 40%, и в результате функции оказывались нарушенными в значительно меньшем объеме. Было показано, что введенные клетки мигрировали в головной мозг, преимущественно в зону поражения и дифференцировались в нейроны и клетки глии. Сравнение при этом внутривенного и интрастриального способа трансплантации клеток показало, что внутривенное введение является более эффективным.
По данным других авторов стволовые клетки ПК не мигрируют через ГЭБ, а только стимулируют эндогенный нейро- и ангиогенез. Если экстраполировать дозозависимую терапию на человека, то для достижения эффекта, как оказалось, понадобится около 20 доз размороженных проб ПК (1,5 -2 л пуповинной крови). Схожие результаты (функциональное восстановление) были получены и при внутривенной трансплантации стволовых клеток ПК в модели повреждения спинного мозга у животных, что приводит к мнению о том, что терапевтическое действие стволовых клеток ПК при неврологичеком дефиците неспецифично и не обусловлено их нейрональной дифференцировкой.
Известна работа исследователей из Тайваня, которые проводили рандомизированные контролируемые клинические испытания с целью оценки осуществимости, безопасности и эффективности применения гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF) для лечения инсульта. Как известно, G-CSF мобилизует стволовые клетки и обладает противовоспалительным и нейропротективным действием. В испытаниях приняли участие пациенты с острым ишемическим инсультом, случившемся не ранее 7 дней до испытаний. Пациенты (7 человек) в течение 5 дней получали подкожные инъекции G-CSF (15 мкг/кг в день). В течение года никто из прошедших 5-дневный курс лечения G-CSF пациентов не умер и у них не было неблагоприятных побочных эффектов. Улучшения неврологической функции у них были значительно большими, чем у пациентов контрольной группы. Эти клинические испытания показали, что применение G-CSF в острой фазе ишемического инсульта безопасно и приводит к значительному улучшению состояния пациентов. Известно, что компания Stem Cell Therapeutics (Канада) объявила о “позитивных” результатах IIa фазы клинических испытаний лечения острого инсульта при использовании метода мобилизации стволовых клеток.
Другая серия клинико-экспериментальных работ была выполнена на мезенхимальных стволовых клетках (МСК), которые помимо основных направлений дифференцировки (остеобласты, хондробласты и адипоциты) способны также дифференцироваться в нейроны и глию. Кроме того, МСК обладают способностью стремиться к зонам повреждения тканей в организме, могут влиять на течение процессов воспаления и репарации в этих областях. Эти свойства МСК формируют основу для разработки новых методов клеточной терапии ишемического инсульта и других неврологических заболеваний. Так, в частности, была показана эффективность трансплантации МСК костного мозга на экспериментальных животных с ишемическим инсультом. При этом наблюдалось улучшение кровоснабжения в ишемизированных областях и востанавливались утраченные в результате инсульта функции мозга. Было доказано, что ведущую роль в функциональном восстановлении после инсульта играет ангиогенез и стимулирующее действие ростовых факторов, выделяемых стволовыми клетками. В журнале Annals of Neurology опубликованы результаты I фазы клинических испытаний метода аутотрансплантации МСК костного мозга пациентам с ишемическим инсультом в Ajou University Hospital (Южная Корея). Корейская группа показала безопасность и эффективность такой клеточной терапии. Динамика неврологического дефицита сравнивалась через год после лечения. Полученные данные продемонстрировали, что у пациентов с лечением МСК динамика состояния была существенно лучше по сравнению с контролем, а именно уменьшалась область инсульта. Функциональные тесты у больных, получавших инфузию стволовых клеток также были существенно лучше, чем в группе контроля, при осмотре через 3, 6 и 12 месяцев.
Несколько лет назад в России также начали использовать стволовые клетки при реабилитации больных, перенесших инсульт. Пока речь идет лишь об ограниченных клинических испытаниях, но полученные результаты обнадеживают. В клинике “НейроВита” (Москва), в Российском государственном медицинском университете, Новосибирском Институте иммунологии, Центре клеточных технологий при Челябинской областной клинической больнице подобные работы начались около года назад. На сегодня такой курс лечения прошли несколько десятков пациентов, перенесших тяжелый инсульт. Говорить об окончательных результатах, по мнению исследователей, пока слишком рано, так как для восстановления структуры мозга требуется не один месяц. Однако полученные уже результаты свидетельствуют об успешной реабилитации неврологических больных.
Каковы же возможные механизмы терапевтического действия МСК?
К таким механизмам прежде всего можно отнести дифференцировку в нейрональные клетки, слияние с клетками хозяина, паракринную стимуляцию нейро- и ангиогенеза факторами роста. Способность МСК к миграции в головной мозг и преодолению гемато-энцефалического барьера является весьма сомнительной, только 0.02% (из 2 миллионов введённых МСК) окрашиваются позитивно на нейрональные маркёры in situ. Поэтому наиболее вероятным механизмом действия МСК как стимулятора ангио- и нейрогенеза, является паракринный, за счёт синтеза ими факторов роста. Было показано, что биохимические сигналы из зоны мозгового инфаркта способны стимулировать МСК к синтезу факторов роста.
Конечно, при этом остается много нерешенных вопросов, касающихся сроков проведения клеточной терапии после инсульта, эффективной лечебной дозы, оптимальных путей введения клеток и др. Однако имеющиеся на сегодняшний день данные позволяют считать, что при своевременном вмешательстве клеточная терапия способна избавить пациента от последствий инсульта и вернуть его к нормальному образу жизни. Эффект клеточной терапии во многом зависит от того, как быстро обращается пациент за лечением. Чем меньше времени проходит от инсульта до клеточной терапии, тем больше шансов полностью восстановить организм.
Рябинин В.Е., профессор
Источник
Неврологическая реабилитация
Период реабилитации — один из основных в лечении последствий инсульта. И именно от него во многом зависит то, в какой степени пройдет восстановление пациента до нормального состояния.
Инсульт — острое нарушение мозгового кровоснабжения. Он может быть вызван резким сужением просвета артерии, которая питает мозг (например, атеросклеротической бляшкой) или разрывом, чаще всего, маленькой аневризмы на мозговой артерии и последующим кровотечением. Соответственно, выделяют ишемический инсульт, когда кровоток по артерии перекрыт бляшкой, и геморрагический инсульт, когда нарушение кровотока в мозге вызвано разрывом артерии и кровотечением.
Сегодня инсульт — одно из частых и в то же время одно из тяжелых заболеваний в неврологии, имеющих сосудистое происхождение. В тяжелых случаях инсульт может закончиться летальным исходом. Кроме того, тяжелыми могут быть и последствия инсульта. У пациентов, перенесших инсульт, могут быть нарушены речь, ходьба, движения рук и ног, зрение, слух и т. д., в зависимости от того, какая область мозга пострадала при нарушении кровотока.
В настоящее время в арсенале нейрохирургов имеются современные малоинвазивные методы лечения инсультов, включая ангиопластику, стентирование, а также эндартерэктомию. При геморрагических инсультах приходится проводить открытое вмешательство в виде трепанации черепа для перевязки кровоточащего сосуда и удаления крови, которая сдавливает головной мозг.
Лечение последствий инсульта — долгая история, которая во многом зависит от обширности инсульта, интенсивности симптоматики, наличия сопутствующих заболеваний, возможности пациента проходить реабилитационное лечение. Период реабилитации — один из основных в лечении последствий инсульта. И именно от него во многом зависит то, в какой степени пройдет восстановление пациента до нормального состояния.
Одним из важных этапов лечения последствий инсульта является восстановление пораженных клеток мозга — нейронов, а также сосудов мозга. В настоящее время применение стволовых клеток у таких пациентов -это единственный способ, с помощью которого можно добиться регенерации тканей мозга. Терапия стволовыми клетками у пациентов с перенесенным ранее инсультом позволяет восстановить состояние кровеносных сосудов мозга, а также самих нервных клеток.
В лечении ишемического инсульта терапия стволовыми клетками начала применяться с конца 80-х годов прошлого века. Сегодня современные технологии позволяют использовать для целей клеточной терапии аутологичные мезенхимальные стволовые клетки, которые, в отличие от фетальных и эмбриональных стволовых клеток, берутся из собственных тканей пациента, в частности, из жировой ткани или костного мозга. За все время, как стволовые клетки стали применяться при последствиях инсульта, данный метод был использован более чем у 16000 пациентов. Сегодня терапия стволовыми клетками сертифицирована для применения в России.
Для применения мезенхимальных стволовых клеток у пациента берется костный мозг с помощью пункции, обычно из бедренной или тазовой кости. После этого врач отбирает из костного мозга стволовые клетки. Затем выделенные клетки помещают в специальную среду для культивирования в лабораторных условиях. Через 1,5-2 месяца полученные стволовые клетки вводятся пациенту внутривенно. В среднем после культивации количество стволовых клеток возрастает до 200 миллионов. Данную процедуру рекомендуется повторить через полгода, чтобы повысить эффективность клеточной терапии.
Источник
Ежегодно инсульт становится причиной смерти более 5 млн человек по всему миру. О том, как сибирские учёные планируют бороться с последствиями сосудистой катастрофы, используя клеточные технологии, редакции портала «Сибмеда» рассказала Елена Черных, руководитель лаборатории клеточной иммунологии, заместитель директора по науке Института фундаментальной и клинической иммунологии, профессор, член-корреспондент РАН.
Нервные клетки – восстанавливаются
Из тех, кто выживает после острого нарушения мозгового кровообращения, лишь менее половины полностью восстанавливают навыки, необходимые для полноценной жизни. Во многом причиной этому служит то, что единственный способ терапии таких больных, признанный эффективным, – тромболизис – может применяться лишь для 3% пациентов. Однако и такая терапия по факту лишь останавливает деструктивный процесс (нейтрализует тромб, препятствующий питанию мозга кислородом), но не способствует восстановлению повреждённого головного мозга.
«Чтобы проводить такую терапию, необходимо застать первые три часа заболевания, – объясняет Елена Черных. – За это время нужно поставить диагноз и доказать, что инсульт произошёл в результате образования тромба, не говоря о том, чтобы пациент оперативно оказался в неврологическом центре. Кроме того, есть множество противопоказаний для этой терапии. В результате получается, что проводиться она может не более чем 3% пациентов. Более того, на неё отвечает не 100% пациентов, которые ей подвергаются».
Решение проблемы начало проясняться по мере того, как учёным стали открываться возможности восстановления нервной системы. Пресловутое утверждение, что нервные клетки не восстанавливаются, за последние 20 лет оказалось фактически опровергнутым. И если традиционно терапия инсульта была направлена на нейропротекцию – защиту нервных клеток вокруг зоны повреждения, которые находятся в «пограничном состоянии» – проще говоря, ещё не успели погибнуть, то теперь учёным известны куда более эффективные способы «реанимации» жизненно важного органа. Эти способы заключаются в стимуляции тех восстановительных процессов, которые естественным путём протекают в головном мозге после его повреждения.
Как происходит восстановление?
Выяснилось, что такие процессы протекают с помощью образования новых нейронных связей (нейропластичность) и новых кровеносных сосудов (ангиогенез), а также в результате создания новых нервных клеток из стволовых. Стволовые нейральные клетки, помогающие восстановить нервную ткань, были обнаружены в определённых зонах головного мозга, откуда они мигрируют в зону повреждения и «превращаются» в нейроны и другие нервные клетки.
«Когда стали изучать механизм клинического эффекта при трансплантации стволовых клеток костного мозга, оказалось, что непосредственной дифференцировки этих стволовых клеток в нервные не происходит, а позитивный эффект опосредован продукцией стволовыми клетками рядом нейротрофических факторов, – рассказывает Елена Черных. – Эти факторы, то есть продукты стволовых клеток, стимулируют нейрогенез – образование нервных клеток и усиливают нейропластичность – образование новых связей между нейронами в том месте, куда стволовые клетки попадают».
Уже 10 лет по всему миру, в том числе в новосибирском Институте фундаментальной и клинической иммунологии, вовсю исследуется «клеточный» способ восстановления мозговой деятельности, проходя испытание за испытанием. Однако мало где сегодня изучают возможности клеток иммунной системы, способных служить тем же целям, что и стволовые. К точкам земного шара, где ведутся такие исследования, относится и Новосибирск.
«Раньше считалось, что, когда при повреждении мозга в мозговую ткань из периферической крови попадают клетки иммунной системы, то это свидетельствует о нарушении гематоэнцефалического барьера, что подтверждает наличие патологического процесса, а иммунные клетки должны усиливать воспаление, – продолжает профессор. – Но, когда начали изучать, как эти клетки действуют, оказалось, что многие из них продуцируют те же факторы, что и стволовые клетки, тем самым стимулируя репаративные процессы. И этот вывод подтвердил целый ряд экспериментальных фактов. Конечно, для того, чтобы понять, почему в одном случае мы видим повреждающие эффекты, а в другом – стимуляцию восстановления, пришлось разобраться, какие иммунные клетки задействованы в той или иной ситуации, в каком количестве и куда именно они проникают».
Как проходит лечение?
Один из подходов к восстановлению нервной ткани с помощью стволовых клеток, который используется в новосибирском НИИ иммунологии, официально зарегистрирован в качестве новой медицинской технологии. Начиная с 2012 г., он доступен всем пациентам на базе института в качестве платной услуги. Однако на сегодняшний день эта услуга отнюдь не является бюджетной: стоимость основного этапа лечения – порядка 100 тыс. руб.
Согласно этой технологии, стимулируют выход стволовых клеток из костного мозга в периферическую кровь с помощью специальных препаратов. Далее из крови на специальной аппаратуре получают обогащенную популяцию стволовых клеток, которые заготавливают и хранят в специальных условиях, а потом c определённой периодичностью вводят пациенту эндолюмбально – в спинно-мозговую жидкость через с пункцию в поясничном отделе позвоночника. Улучшение наблюдается уже через месяц: восстанавливаются функциональные нарушения – такие, как нарушения речи и двигательной активности. Пока пациентов, прошедших эту процедуру, не так уж много, однако исследователи уже успели установить не только выраженные улучшения после её прохождения, но и то, что пациентами она переносится хорошо.
Другой подход к стимуляции репаративных процессов в нервной ткани, который используется на базе института – пока в качестве клинического исследования, подразумевает выделение стволовых клеток непосредственного из костного мозга с помощью пункции. Взятые клетки вводятся в организм пациента также посредством прокола в поясничном отделе, но, в отличие от предыдущего метода, однократно. Согласно результатам исследований, процедура эта не оказывает выраженных побочных эффектов, при этом позволяет добиться неврологического улучшения для пациентов, у которых не наблюдалось положительной динамики на протяжении последних месяцев.
Исследования этого метода проводили в двух группах: у пациентов, поступивших менее чем через год после инсульта, и у пациентов, приступивших к лечению по прошествии года после сосудистой катастрофы. В итоге пациенты из первой группы продемонстрировали более выраженные неврологические улучшения.
Иммунитет поборется с болезнью
Использование иммунных клеток для восстановления после инсульта на базе института тоже проводится в порядке клинических исследований. С этой целью используются определённые иммунные клетки – макрофаги второго типа. С их участием было проведено контролируемое исследование, в котором также приняли участие две группы. В одну вошли пациенты, получающие традиционное лечение, в другую – пациенты, получающие лечение с помощью иммунных клеток.
Представители обеих групп были близки по тяжести инсульта, локализации очага повреждения и клиническим проявлениям. В результате из тех, кто получал лечение макрофагами второго типа, заметные улучшения продемонстрировали 75% пациентов, в то время как в группе получавших стандартное лечение пациентов с заметными улучшениями оказалось лишь 25%. Преимущество этого метода в том, что иммунные клетки, в отличие от стволовых, добываются из крови, а не из костного мозга, что технически более просто и менее затратно.
Однако на базе института апробируется ещё менее инвазивный и более доступный для пациента способ лечения. Речь идёт об интерназальном способе – введении необходимой субстанции с помощью ингаляций. В данном случае такой субстанцией выступают не сами клетки, а их продукт, а именно – продукт иммунных клеток, макрофагов второго типа.
«Основная проблема подобной терапии в том, что не всегда просто сделать так, чтобы вводимые клетки попали близко к зоне повреждения, – говорит Елена Черных. – Если мы имеем дело уже не с острым периодом инсульта, то преградой является восстановившийся гематоэнцефалический барьер, который препятствует вхождению препарата в зону повреждения. А когда мы используем интераназальный путь введения нейроторофических факторов, мы имеем возможность быстрого непосредственного проникновения этих факторов в повреждённую зону головного мозга».
Пациент, проходящий такую терапию, получает 10-15 минут ингаляции с помощью компрессорного ингалятора в течение 20-25 дней. Очевидные преимущества такой терапии – отсутствие рисков инвазивных методов лечения, техническая простота и предполагаемая финансовая доступность – позволяют учёным прогнозировать: в клинической практике этот метод приживётся. Тем более, что пациенты, прошедшие эту терапию – пока, правда, немногочисленные – уже продемонстрировали, по словам специалистов, хорошие результаты.
Однако ни этому, ни остальным методам восстановления после инсульта с помощью стволовых и иммунных клеток в ближайшее время не суждено появиться в российских больницах: законодательно использование клеточных технологий в нашей стране пока не урегулировано. Тем не менее, возможности их использования на благо пациентов сегодня всё же существуют. Так, если новый метод внесен разработчиками в реестр новых медицинских технологий, то он может применяться в клинической практике.
Один из таких методов, собственно, уже применяется в НИИ фундаментальной и клинической иммунологии. Кроме того, на сегодняшний день научный институт, доказавший безопасность и эффективность собственного нового метода, может использовать его на своей базе. Поэтому возможно, что по окончании клинических исследований ряд из разрабатываемых методов найдет применение в новосибирской клинике иммунопатологии.
Источник