Мемантин после инсульта как долго принимать
Мемантин (Акатинол Мемантин) – селективный блокатор NMDA-глутаматных рецепторов. Механизм его действия, которого связан с модулированием глутаматергической передачи, опосредующей кортико-кортикальные и кортико-субкортикальные взаимосвязи в головном мозге. Отзывы врачей Юсуповской больницы о препарате акатинол мемантин хорошие. Препарат используют для лечения деменции у пожилых людей.
Глутамат является основным возбуждающим нейромедиатором в головном мозге. Он широко представлен в неокортексе (новой коре) и гиппокампе. В норме при активации пресинаптического нейрона глутамат высвобождается в синаптическую щель и связывается с NMDA-рецептором. Это открывает катионный канал, который в покое закрыт ионом магния. Открытие канала способствует поступлению кальция, который регулирует жизнедеятельность нейронов.
Накопление глутамата в синапсах вследствие нарушения обратного захвата пресинаптическими нейронами или нарушения его захвата глиальными клетками приводит к постоянной фоновой низкоуровневой активации нейронов. На фоне относительно высокого уровня шума головной мозг утрачивает способность выделять физиологические сигналы, которые приходят к синапсу. Это нарушает когнитивные процессы.
Мемантин блокирует катионный канал в состоянии покоя, но при полной деполяризации мембраны удаляется из канала, благодаря чему нормализуется синаптическая передача, восстанавливается соотношение сигнала и шумового фона. Блокируя внутриклеточный ток кальция, акатинол мемантин оказывает нейропротекторное действие. В инструкции нет информации о применении препарата акатинол мемантин детям. Отзывы родителей, чьим детям назначали препарат, можно прочитать на форуме.
Применение при деменции
Деменция – это приобретенное снижение интеллекта, которое возникает в результате органических поражений головного мозга и нарушает социальную адаптацию больного, делает его неспособным к профессиональной деятельности или ограничивает возможности самообслуживания и нарушает бытовую независимость. Деменция выявляется у 5-8 % пожилых лиц. С увеличением возраста на каждые 10 лет риск развития деменции удваивается.
Акатинол, как свидетельствуют отзывы пациентов, принимающих препарат, способен облегчить жизнь пациентам и их родственникам. Базисная терапия деменции предполагает применение методов лечения, направленных на ограничение дальнейшего повреждения мозга или обеспечивающих длительную стабилизацию, замедление снижения психических функций. В конечном итоге это позволяет увеличить выживаемость, более длительно поддерживать бытовую независимость пациента и отсрочить момент развития его беспомощности.
При деменциях различной природы, прежде всего болезни Альцгеймера и сосудистой деменции, деменции с тельцами Леви или смешанных формах деменции в качестве базисной терапии неврологи Юсуповской больницы применяют современные антидементные средства, к которым относится акатинол мемантин. Цена препарата немалая, но отзывы превосходные.
У пациентов, страдающих умеренной и тяжёлой деменцией, на фоне терапии акатинолом не только отмечается достоверное улучшение когнитивного и функционального статуса, повседневной активности, но и уменьшаются поведенческие нарушения. У больных с ранней стадией болезни Альцгеймера, достоверное улучшаются когнитивные функции, общее состояния и поведение. Отзывы о препарате акатинол свидетельствуют, что лекарственное средство оказывает положительное действие на протяжении всего течения болезни Альцгеймера.
Мемантин оказывает следующее действие:
- Улучшает выполнение нейропсихологических тестов;
- Замедляет нарастание функционального дефицита и поведенческих нарушений;
- Улучшает общее состояние пациентов;
- Повышает собранность и степень бытовой независимости пациентов, снижает потребность в уходе.
На фоне приёма Мемантина улучшается способность пациентов, страдающих умеренной и тяжёлой болезнью Альцгеймера, самостоятельно вставать, умываться, двигаться, принимать ванну или душ, вести беседу, одеваться, пользоваться туалетом.
Положительные эффекты
Положительный эффект акатинола в функциональной сфере лишь частично зависит от улучшения когнитивных функций. У больных с поздней стадией болезни Альцгеймера именно поведенческие нарушения, которые выявляются почти у 80 % больных, являются зачастую основным фактором, который затрудняя уход за пациентом. Это относится к следующим расстройствам:
- Возбуждение;
- Блуждание;
- Агрессия;
- Бред.
Мемантин уменьшает выраженность поведенческих нарушений, прежде всего возбуждения и агрессии, а также нарушения пищевого поведения, раздражительность, эмоциональную лабильность и бред. При приёме препарата уменьшается потребность в нейролептиках, применение которых сопряжено с ухудшением долгосрочного прогноза. При уменьшении поведенческих нарушений пациентов существенно ослабляется дистресс ухаживающих лиц.
У больных деменцией с тельцами Леви препарат уменьшает выраженность психических флуктуаций, не провоцируя галлюциноза и эпизодов спутанности. Эффективность препарата у разных больных не одинакова. Клинический эффект, который касается того или иного типа расстройств, как показывают отзывы врачей, отмечается более чем у 70 % пациентов с болезнью Альцгеймера. Улучшение когнитивных функций любой степени после трёхмесячного курса лечения наступает у 55 % больных с умеренной и тяжелой болезнью Альцгеймера, выраженное улучшение – у 39 %, значительное – у 13 %. По результатам шестимесячного лечения показатели улучшаются.
Отзывы врачей и анализ динамики отдельных когнитивных функций в процессе лечения показывает, что наибольшее улучшение отмечается в тестах, которые оценивают ориентацию, понимание обращённой речи, а также конструктивные праксис (способность к выполнению целенаправленных двигательных актов) и зрительно-пространственные функции. Положительное действие Мемантина проявляется в улучшении способности пациентов к взаимодействию с окружающими и к коммуникации.
Первично мемантин преимущественно действует на внимание и регуляторные когнитивные процессы, которые связаны с функцией лобных долей. Улучшение речевых и зрительно-пространственных функций, памяти, ориентации может быть вторичным. Мемантин стабилизирует аффективное состояние и уменьшает выраженность симптомов депрессии.
Отзывы о применении при ишемическом инсульте
Ишемический инсульт является актуальной медико-социальной проблемой вследствие широкой распространённости, высоких показателей инвалидизации и летальности. Неврологи Юсуповской больницы современные подходы к лечению ишемического инсульта. Врачи применяют методы, направленные на восстановление кровоснабжения вещества головного мозга, в течение первых часов заболевания с целью восстановления кровотока в поражённом сосуде и методы защиты ткани мозга. Это позволяет предотвратить развитие необратимого повреждения вещества головного мозга или уменьшить его объём.
Реперфузию проводят путём введения тромболитика – рекомбинантного тканевого активатора плазминогена. Вторым основным направлением лечения инсульта в острой стадии является нейропротективная терапия. При ишемическом и геморрагическом инсульте в качестве нейропротектора неврологи используют акатинол мемантин. Препарат может оказывать нейропротекторное воздействие при глобальной и очаговой ишемии мозга.
Мемантин уменьшает объем очага поражения и снижает неврологический дефицит после ишемического инсульта. Как свидетельствуют отзывы врачей, на фоне введения акатинола мемантина повышается выживаемость после внутримозгового кровоизлияния, часто снижающаяся при проведении системной тромболизисной терапии. Препарат эффективен в качестве средства вспомогательной терапии для повышения безопасности системного тромболизиса.
Побочное действие
При применении акатинола мемантина пациентов может беспокоить головная боль, повышенная утомляемость. Редко развивается сонливость, чаще – спутанность сознания. У пожилых людей, страдающих сердечно-сосудистыми заболеваниями («сердечников») может повышаться артериальное давление.
Существует незначительный риск развития побочных эффектов со стороны органов пищеварения:
- Запора;
- Тошноты;
- Рвоты.
Побочное действие на нервную систему, как свидетельствуют отзывы пожилых пациентов, проявляется головокружением, нарушением походки, редко – судорогами. Галлюцинации могут возникать у пожилых пациентов с болезнью Альцгеймера на стадии тяжёлой деменции.
Получить консультацию о механизме действия и побочных эффектах акатинола метаната у пожилых людей, ознакомиться с отзывами пациентов можно по телефону. Неврологи Юсуповской больницы назначают препарат при наличии показаний и отсутствии противопоказаний. Если лекарственное средство оказывает побочное действие, его отменяют и проводят симптоматическую терапию.
Источник
1752 просмотра
16 сентября 2018
Добрый день!
Принимаем ксарелто и глиатилин после инсульта
Недавно невролог назначил акатилон мемантин,прочитала что этот препарат не совместим с ксарелто, так как надо постоянно проверять протромбиновое время и мно
Еще думаю давать или нет акатинол мемантин,тк очень много побочных действий
Скажите,совместимы ли эти препараты ,можно ли принимать их вместе,пока нет возможности поехать к другому неврологу
Есть ли какие нибудь сильные ноотропы после инсульта?
На сервисе СпросиВрача доступна консультация невролога онлайн по любой волнующей Вас проблеме. Врачи-эксперты оказывают консультации круглосуточно и бесплатно. Задайте свой вопрос и получите ответ сразу же!
Педиатр
Здравствуйте сколько лет пациенту?
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Кардиолог, Терапевт, Невролог
Здравствуйте. в общем-то эти препараты назначают совместно. прием ксарелто не треюует контроля свертываемости крови, если нет признаков кровотечения. нужно обязательно сделать УЗДГ сосудов шеи.
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Ксения, спасибо
Может есть какой то хороший ноотроп после инсульта?
Терапевт
В каком состоянии пациент? Акатинол рекомендуют для лечения деменции. Очень хороший ноотпоп в восстановительный период – цераксон 10 мл*2р/суди.
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Лариса, цераксон принимала,сначало капельницы, потом 1 р в сутки по пакетику примерно месяц, не заметила улучшений
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Лариса, перепады настроения частые, плачет, забывает много
Кардиолог, Терапевт, Невролог
какой сейчас неврологический дефицит?
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Ксения, ходит, проблемы с рукой, но много забывает, когнитивных нарушений много
Терапевт
Тогда давайте акатинол,с ксарплто совместим,потому что кспрелто не требует контроля мно. Это замечание касается других антикоагулянтов-варфарина например. А ксарелто тем и отличается,что контроля не требуется.
Педиатр
Все это совместимо. И контроль коагулограммы не нужен
Возможно применение Церебролизин
Невролог, Терапевт
Добрый день. Всё это можно вместе. Сколько времени прошло после инсульта?
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Терапевт
Здравствуйте! Можно ницерголин по 1т 3 р вдень.
Терапевт
Ксареклто требует только внимания при сочетании с пищей, богатой витамином К: шпинат, свиная печень, помидоры, зеленый горошек, капуста белокочанная, тк возможно снижение его терапевиической эффективности. А так-эти препараты вполне совместимы, в т ч с ницерголином. Холестерин,общ анализ крови,сахар в норме?
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Альфира, в норме, но по вечерам прописали еще статины
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Альфира, еще пьем актовегин и мексидол,вот их достаточно месяц пить или можно 2-3 мес
Инфекционист
Здравствуйте! При применении ксарелто обязательно надо контролировать МНО.Препарат мемантин акатилон рименяется при сосудистой деменции,если его назначил специалист,значит есть показания к его применению,поэтому для улучшения состояния необходимо выполнять рекомендации доктора.
Невролог, Терапевт
Основные препараты в постинсультный период- Мексидол, Актовегин, Кавинтон, Церебролизин. Но проблема в том, что если часть мозга отмерла, то ее ничем не восстановишь. Бывает же, когда ишемия была, но не настолько критична и не привела к полной гибели участка мозга. В таких случаях восстановление происходит хотя бы частичное. Лечение назначено хорошее, но все зависит от ее потенциала восстановления. Период до полугода после ОНМК- то время, когда воздействие максимально эффективно с лечебной точки зрения. Дальше все будет направлено только на поддержку. И не забывайте о тех болезнях, что привели к инсульту- ИБС, атеросклероз, наверно гипертония и/или нарушение ритма. Обязателен прием статина.
Терапевт
Это метаболики, т е они улучшают обмен веществ в головном мозге. Лучше продлить их курс до 2 мес хотя бы, чтобы лучше и легче проявили свой эффект ноотропы.
Терапевт
статины- показаны.надо стремиться нижней границе нормы на них, чтобы не прогрессировал атеросклероз. соблюдайте диету гипохолестериновуюнасыщенную антиоксидантами( продукты фиолетового, красного цветов),контроль АД.
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Альфира, спасибо
Скажите после инсульта прошло 3 месяца, я умею делать капельницы и уколы, хотела ей чуть позже прокапать церебрализин и цераксон, незнаю только что будет лучше уколы или капельницы
Еще вопрос а капельницы нужно ставить до обеда или возможно вечером?
Детский невролог, Невролог
Здравствуйте, препараты совместимы. Насчёт мемантина не сомневайтесь, восстановление с ним пойдёт более эффективно.
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Айрат, спасибо
Скажите , пьем актовегин и мексидол уже 2 месяца почти, можно заканчивать или пить дальше
Из таблеток сейчас
Акатинол мемантин,ксарелто, мексидол, актовегин
Хочу еще сделать уколы или капельницы церебрализина и цераксона, незнаю что лучше
Марина, 16 сентября 2018
Клиент
Айрат, еще знаю такой препарат как ноотропил и фенотропил
Пока достаточно или можно какой то ноотроп добавить?
Гинеколог, Кардиолог, Венеролог
Здравствуйте. Эти препараты можно спокойнот виесте принимать оба препарата хорошие
Гематолог, Терапевт
Принимать впринципе можно,но контроль коагулограммы хотя бы на начале приема действительно необходим почаще
Терапевт
После онмк хорош церебролизин в/в капельно,20-30 инфузий, а потом можно фенотропил 30 дней. Инфузии ноотропов делать в первой половине дня,потому что может повлиять на нарушение сна из-за активации нервной системы.
Терапевт
лучше цераксон сначала вв 7-10 дн,потом вм еще 2нед.Церебролизин более аллергеный препарат,тем более еще актовегин делаете, так что эта комбинация с лихвой перекроет церебролизин без его побочек.
Терапевт
и ,да, все нейростимуляторы лучше принимать до 17.00 из-за их возбуждающего действия.
Детский невролог, Невролог
Лучше глиатиллин 4,0 в/в стр-но 10 дней. Мексидол и актовегин в таб достаточно
Оцените, насколько были полезны ответы врачей
Проголосовало 3 человека,
средняя оценка 2
Что делать, если я не нашел ответ на свой вопрос?
Если у Вас похожий или аналогичный вопрос, но Вы не нашли на него ответ – задайте свой вопрос врачу онлайн.
Если Вы хотите получить более подробную консультацию врача и решить проблему быстро и индивидуально – задайте платный вопрос в приватном личном сообщении. Будьте здоровы!
Источник
Мемантин повышает безопасность тромболизиса при инсульте
Предпосылки и цель исследования. Несмотря на наличие побочных эффектов, в т.ч. N-метил-D-аспартат-опосредованную нейротоксичность, введение рекомбинантного тканевого активатора плазминогена (рТАП) остается единственным одобренным методом лечения острого ишемического инсульта.
Мемантин, используемый для лечения болезни Альцгеймера, является антагонистом рецепторов N-метил-D-аспартата. Изучили эффективность использования мемантина в качестве нейропротектора при проведении системного тромболизиса после инсульта. Методы.
Все эксперименты in vitro, а именно, оценку воздействия N-метил-D-аспартата, кислородо-глюкозной депривации и N-метил-D-аспартат-опосредованную видеомикроскопию с целью определения притока кальция в клетку, проводили на нейронах коры мышей на фоне введения рТАП и мемантина.
Терапевтическую безопасность одновременного применения рТАП и мемантина изучили в моделях тромботического инсульта и внутримозгового кровоизлияния у мышей. Объем ишемического и геморрагического поражения оценивали по результатам МРТ, а неврологическое обследование выполнили путем проведения струнного теста и с помощью автоматизированного анализа походки. Результаты.
Наблюдения in vitro продемонстрировали наличие у мемантина способности пред-
отвращать нейротоксический эффект рТАП в культивированных кортикальных нейронах.
Несмотря на то что мемантин не оказывал влияния на фибринолитическую активность рТАП, наблюдения in vivo показали, что он ослаблял вредные последствия отсроченного тромболизиса, а именно уменьшал объем очага поражения и снижал неврологический дефицит после ишемического инсульта. Кроме того, на фоне введения мемантина повышалась выживаемость после внутримозгового кровоизлияния, часто снижающаяся при проведении системного тромболизиса. Выводы. Мемантин можно использовать в качестве дополнительной терапии для повышения безопасности системного тромболизиса.
Введение тромболитика – рекомбинантного тканевого активатора плазминогена (рТАП/ТАП) – остается единственным одобренным методом оказания неотложной помощи при ишемическом инсульте [1].
Тем не менее его использование ограничено непродолжительным терапевтическим окном [2] из-за отсутствия эффективности и риска развития потенциальных нежелательных эффектов [3] при отсрочке проведения тромболизиса или выполнении тромболизиса у особой группы восприимчивых лиц [4].
ТАП оказывает ряд ключевых эффектов на уровне гематоэнцефалического барьера и вещества головного мозга [5]. В сосудах ТАП способствует фибринолизу и может проникать через гематоэнцефалический барьер [6].
В веществе головного мозга он может действовать согласованно с ТАП, высвобождаемым нейронами и эндотелиальными клетками [5]. Благодаря взаимодействию с несколькими белками/рецепторами [7], ТАП оказывает воздействие не только как активатор плазминогена.
Например, ТАП также соединяется с белком, связанным с рецепторами липопротеинов низкой плотности, и таким образом увеличивает металлопротеиназа-зависимую проницаемость гемато-энцефалического барьера [8].
ТАП также способствует преобразованию тромбоцитарного фактора роста-C в его активную форму, и этот механизм, предположительно, приводит к нарушению целостности гематоэнцефалического барьера [9].
Интересно, что ТАП также является положительным нейромодулятором рецепторов N-метил-D-аспартата (NMDA-рецепторов), что приводит к повышению чувствительности нейронов к эксайтотоксинам [10, 11]. Таким образом, помимо известной полезной фибринолитической активности, у пациентов с инсультом рТАП может также способствовать развитию геморрагической трансформации[12] и гибели нейронов [4].
NMDA-опосредованная эксайтотоксичность считается основной причиной гибели нейронов после инсульта [13]. К сожалению, все стратегии, направленные на NMDA-рецепторы, были неэффективны в клинической практике [14].
Ранее, в модели тромботического инсульта у мышей удалось доказать, что экспериментальная стратегия, разработанная для блокировки взаимодействия ТАП с NMDA-рецепторами, приводила к стойкому уменьшению объема поражения головного мозга, уменьшению неврологического дефицита и расширению терапевтического окна для введения рТАП [15].
Неконкурентный антагонист NMDA-рецепторов мемантин (1-амино-3,5-диметиладамантан) был одобрен для симптоматического лечения умеренных и тяжелых форм болезни Альцгеймера.
В ряде доклинических исследований на грызунах было высказано предположение о потенциальной возможности использования мемантина в качестве нейропротектора при ишемическом или геморрагическом инсульте [16–18].
Примечательно, что мемантин действует преимущественно на NMDA-рецепторы, содержащие субъединицу GluN-2D [19], фактически являющуюся избирательной целью нейротоксичного действия ТАП. [20, 21]. Таким образом, предположили, что для улучшения исходов после инсульта сочетание рТАП с мемантином может быть эффективным.
МЕТОДЫ Материалы
N-метил-D-аспартат (NMDA) и мемантин были предоставлены компанией Tocris (Бристоль, Великобритания). Человеческий рТАП (Актилизе) был предоставлен компанией Boehringer Ingelheim (Париж, Франция).
Модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, поли-D-лизин, ламинин, глутамин, цитозин β-D-арабинозид, глицин, N-2- гидроксиэтилпиперазин-N’-2-этансульфоновую кис- лоту, бикарбонатный буферный солевой раствор и коллагеназу VII типа предоставили представители компании Sigma-AldrВМК (L’Isle d’Abeau, Франция).
Fura2/AM, эмбриональную бычью сыворотку и лошадиную сыворотку доставили из Invitrogen (Сержи-Понтуаз, Франция). Тромбин был предоставлен компанией Kordia (Лилль, Франция). Гематологические микропипетки доставили из компании Hecht (Sondheim-Rhoen, Германия).
Культуры нейронов
Культивированные кортикальные нейроны получи- ли из эмбрионов швейцарских мышей (E14-15), предоставленных CURB (Кан, Франция), как описывали ранее [21].
Для подавления пролиферации глиальных клеток добавляли β-D-арабинозид (в концентрации 10 мкмоль/л) через 3 дня in vitroили через 7 дней in vitroдля изучения процесса гибели нейронов, видеомикроскопии – с целью определения поступления кальция в клетки соответственно.
Гибель нейронов вследствие эксайтотоксичности
Как было описано ранее [21], эксайтотоксичность индуцировали на 12–13-й день in vitroпутем введения NMDA (10 мкмоль/л) в бессывороточную, модифицированную по способу Дульбекко, среду Игла с добавлением 10 мкмоль/л глицина на 24 часа.
NMDA вводили отдельно или в сочетании с рТАП (0,3 мкмоль/л), и/или мемантином (в концентрациях 1, 5 или 10 мкмоль/л).
Через 24 часа количественно оценивали степень гибели нейронов путем определения содержания лактатдегидрогеназы, высвобождаемой из поврежденных клеток (Roche Diagnostics, Мангейм, Германия).
Кислородо-глюкозная депривация культур нейронов
Кислородо-глюкозную депривацию выполнили в гипоксической камере (IN VIVO2 500; Ruskinn) с запрограммированным содержанием 1% O2 и 5% CO2 при 37 °C.
Через 11–12 дней in vitroкортикальные нейроны помещали или не помещали в условия кислородо-глю- козной депривации на 30 минут.
В камере нейроны пересаживали на бессывороточную, безглюкозную, деоксигенированную, модифицированную по способу Дульбекко, среду Игла, а затем добавляли рТАП (0,3 мкмоль/л) и/или мемантин (1 или 10 мкмоль/л).
Через 30 минут клетки извлекали из гипоксической камеры, а среду заменяли на оксигенированную, модифицированную по способу Дульбекко среду Игла (4,5 г/л глюкозы). Во время реоксигенации снова добавляли рТАП и/или мемантин. Гибель нейронов оценивали через 24 часа путем определения содержания лактатдегидрогеназы.
микроскопия с целью определения содержания кальция
Как описывали ранее [3], нейроны (на 14-й день культивирования in vitro) погружали в среду Fura2/AM (10 мкмоль/л) на 45 минут при 37 °C. Дважды вводи- ли NMDA (50 мкмоль/л), чтобы продемонстрировать воспроизводимость реакции.
Затем нейроны в течение 45 минут обрабатывали мемантином (1 и 10 мкмоль/л) и/или рТАП (0,3 мкмоль/л), а затем вновь вводи- ли NMDA.
Соотношение изображений нейронов после культивирования в среде Fura2 (возбуждение: 340/380 нм, эмиссия: 510 нм) получили с помощью ПЗС-камеры (Princeton Instrument,, Трентон, штат Нью-Джерси) и оцифровали (матрица: 256×512 пик- селей) с использованием программного обеспечения Metafluor 6.2r6 (Universal Imaging Corporation, Честер, Пенсильвания). Площадь под кривой представляет собой процентное соотношение выживших клеток после первой реакции и после воздействия NMDA.
Анализ лизиса тромба
Фракцию эуглобулина общей человеческой плаз- мы ресуспендировали в буфере N-2-гидроксиэтилпиперазин-N”-2-этансульфоновой кислоты. Добавляли хлорид кальция (12 ммоль/л) и рТАП (10 МЕ, т.е. 1,5 мкмоль/л) и/или 20 ммоль/л меманти- на. Вели мониторинг поглощаемости (405 нм) в тече- ние 18 часов при 37 °C. Результатом являлось время достижения 50% лизиса тромба.
Животные
Самцов швейцарских мышей (39±3 г), предоставленных компанией CURB (Кан, Франция), помещали в условия циркадного цикла (12 часов света/12 часов темноты) в стандартные полипропиленовые ячейки (37×23,5×18 см; Charles River, Франция) со свободным доступом к воде и пище (SDS Dietex, Франция). Эксперименты осуществляли в соответствии с рекомендациями Совета Французского (Постановление 87/848) и Европейского Сообществ (Постановление 86/609). Во время операции мышей вводили в глубокий наркоз с помощью 2% изофлурана на 70/30% газовой смеси (N2O/O2) и температуру в прямой кишке поддерживали на уровне 37±0,5 °C. Для экспериментов in vivo, благодаря функции рандомизации в Excel, был разработан кластерный рандомизированный дизайн, с рандомизацией по 6 животных в день, включая минимум одно животное в группе каждый день.
Модель тромботического инсульта и тромболизис
Мышей под наркозом помещали в стереотаксические рамки. Как ранее описано [22], развитие тромботического инсульта индуцировали введением тромбина (1,0 МЕ в 1 мкл) непосредственно в среднюю мозговую артерию.
Через 4 часа или 20 минут после образования тромба [15] с целью тромболизиса внутривенно вводили рТАП (в хвостовую вену 200 мкл, 10 мг/кг: 10% в виде болюса и 90% в виде инфузии в течение 40 минут) с или без внутривенного введения мемантина в виде болюса (200 мкл, 20 мг/кг) непосредственно перед инфузией рТАП. Животным контрольной группы вводили такой же объем физиологи- ческого раствора с или без мемантина (n=7–8 в груп- пе). Скорость церебрального кровотока непрерывно контролировали с помощью лазерной допплеровской флоуметрии (Oxford Optronix) в течение часа после формирования тромба, а также во время инъекции препаратов.
Модель внутримозгового кровоизлияния
Выполнили одностороннюю стереотаксическую инъекцию коллагеназы VII типа (0,05 МЕ в 1 мкл) в полосатое тело (координаты: 0,5 мм кпереди, 2 мм латеральнее и 2,5 мм вентральнее брегмы; стереотаксический атлас G. Paxinos & K.B.J. Franklin) [23].
Через 30 минут после индукции внутримозгового кровоизлияния (ВМК) в хвостовую вену вводили катетер для инъекции болюса рТАП (10 мг/кг) или физиологического раствора с или без болюса мемантина (20 мг/кг).
Таким образом, мышей разделили на 4 группы: вводили физиологический раствор (n=9), рТАП (n=10), мемантин/рТАП (n=10) и мемантин (n=8). Выживаемость оценивали через 1, 6, 24 и 72 часа после развития ВМК.
Магнитно-резонансная томография
Исследования выполняли на томографе Pharmascan 7T (Bruker, Германия). Т2-взвешенные изображения получали в мультисрезовой мульти-эхо последовательности с TE/TR=51,3/2500 мс. Двумерную время- пролетную ангиографию (TE/TR=12/7 мс) проводили через 6, 24, и 48 часов после инсульта.
Оценку результатов ангиографии проводили без соответствующего информирования эксперта, по следующим критериям: 0 – полное исчезновение окклюзии артерии на ангио- графических изображениях, 1 – частичный регресс и 2 – нормальный вид.
После развития инсульта получали T2*-взвешенные изображения с использованием последовательности градиентное эхо с компенсацией кровотока (TE/TR=7,7/500 мс). В модели ВМК для оценки объема кровоизлияния также получали T2*-взвешенные изображения.
Объемы ишемического и геморрагического поражений количественно оценивали по результатам МРТ с помощью программно- го обеспечения ImageJ. Волюметрические измерения проводили без информирования эксперта относительно проводимого лечения.
Струнный тест
Мышей подвешивали за лапки на горизонтально натянутой струне диаметром 1,5 мм и оценивали их способность удерживаться в таком положении. После тренировки (3 последовательных испытания до контрольной проверки) в день испытания проводили одно- кратное 30-секундное исследование.
Для оценки показателей тестирования у каждого животного использовали 4-балльную шкалу: 0 баллов – не в состоянии удерживаться на струне, 1 балл – висит на обеих передних лапках; 2 балла – попытки подняться на струну, 3 балла – держится передними лапками и одной или обеими задними лапками за струну и 4 балла – держит- ся 4 лапками и хвостом обхватывает струну, при этом совершает боковое продвижение по струне.
Система CatWalk XT
Аппарат (Noldus Information Technology, Вагенинген, Нидерланды) включает закрытую дорожку (130×68×152 см) со стеклянной пластиной, источника света и высокоскоростную видеокамеру, точно регистрирующую следы лапок.
Полученное видео затем обрабатывается программным обеспечением CatWalk XT (версия 9.0).
После тренировки (2 исследования походки до проведения вмешательства) через 24 часа после развития инсульта у мышей проводили 3 последовательных теста с целью оценки походки.
Все поведенческие тесты провели 2 эксперимента- тора, неосведомленные относительно проведенного лечения.
Статистический анализ
Анализ мощности моделей тромботического инсульта и ВМК определили априорно, по данным литературы и предварительным результатам, соответственно с использованием программного обеспечения G*Power.
Результаты, полученные in vitroи in vivo, представ- лены в виде “среднее значение±СО”. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения JMP. Все значения вероятности были двусторонними.
Статистически значимыми считали разл